支气管哮喘儿童血清IL-16、IL-35、MCP-1的水平变化及临床意义

林志波 黄海忠：惠州市第三人民医院 广东惠州 516000

支气管哮喘儿童血清IL-16、IL-35、MCP-1的水平变化及临床意义

林志波 黄海忠
CHANGE AND CLINICAL SIGNIFICANCE OF IL-16, IL-35, MCP-1 LEVELS OF BRONCHIAL ASTHMA CHILDREN WITH ACUTE EPISODES
LIN Zhibo, HUANG Haizhong

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  【摘 要】 目的 探讨支气管哮喘儿童血清中IL-16、IL-35、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的水平变化及临床意义。方法 选择2012年1月至2014年6月60例哮喘急性发作期患儿为研究对象。选择36例哮喘缓解期患儿为疾病对照组。选择2012年1月至2014年6月期间健康儿童40例为健康对照组。统计受试者血清IL-16、IL-35、MCP-1水平，并对血清IL-16、IL-35、MCP-1水平与年龄、病程、性别、哮喘严重程度、病情进行相关性分析。结果 哮喘急性发作期血清IL-16、MCP-1水平均高于哮喘缓解期、健康对照组（p<001）；缓解期患儿血清IL-16、MCP-1水平高于健康对照组（p<001）；哮喘急性发作期血清IL-35水平均低于哮喘缓解期、健康对照组（p<001）；缓解期患儿血清IL-35水平低于健康对照组（p<001）；哮喘中重度组血清IL-16、MCP-1水平均高于轻度组、对照组（p<001）；轻度组患儿血清IL-16、MCP-1水平高于对照组（p<001）；哮喘中重度组血清IL-35水平均低于轻度组、对照组（p<001）；轻度组患儿血清IL-35水平低于对照组（p<001）；治疗后哮喘急性发作期患儿血清IL-16、MCP-1水平低于治疗前（p<0001），治疗后哮喘急性发作期患儿血清IL-35水平高于治疗前（p<0001）；血清IL-16、MCP-1水平与哮喘严重程度、病情呈正相关（p<005）；血清IL-35水平与哮喘严重程度、病情呈负相关（p<005）。血清IL-16水平与血清MCP-1水平呈正相关（p<005），与血清IL-35水平呈负相关（p<005），血清MCP-1水平与血清IL-35水平呈负相关（p<005）。结论 IL-16、MCP-1在哮喘患儿血中高表达，IL-35在哮喘患儿血中低表达；IL-16、IL-35、MCP-1与哮喘发病及进展密切相关。
  【关键词】 支气管哮喘,病情,IL-16,IL-35,单核细胞趋化蛋白-1

  【Abstract】 Objective To study change and clinical significance of IL-16, IL-35, MCP-1 levels of bronchial asthma children with acute episodes. Methods During January 2012 and June 2012, the 60 cases of children with asthma acute phase were selected as the research objects. 36 asthma children with acute episodes were selected as asthma remission group. 40 cases of healthy crowd were selected as control group. Serum IL-16, IL-35, MCP - 1 levels were detected, and the correlation analysis of serum IL-16, IL-35, MCP - 1 levels with age, course of the disease, gender, severity of asthma were analyzed. Results Serum levels of IL-16, MCP-1 in asthma with acute phase were higher than asthma with remission and control group (p< 0.01); Serum IL-16, MCP-1 levels in remission patients were higher than the healthy control group, with statistical significance (p< 0.01); Serum IL-35 levels in asthma with acute phase were lower than asthma with remission, healthy control group (p< 001); The level of serum IL-35 of children with asthma with remission was lower than the healthy controls, and the difference was statistically significant (p< 0.01); Sever-moderate asthma group serum IL - 16, MCP - 1 levels were higher than in mild group and control group, and the difference was statistically significant (p< 0.01); Children in mild group serum IL - 16, MCP - 1 levels were higher than the control group, with statistical significance (p< 0.01); Serum level of IL-35 of sever-moderate asthma group were lower than mild group and control group, and the difference was statistically significant (p< 0.01); Serum levels of IL-35 in children in mild group was lower than the control group (p< 0.01); After treatment children with asthma acute phase serum IL - 16, MCP - 1 levels were lower than before the treatment, and the difference was statistically significant (p< 0.001); After treatment children with asthma acute phase serum IL - 35 level was higher than before the treatment, and the difference was statistically significant (p< 0.001); Serum IL - 16, MCP - 1 levels were positively correlated with severity of asthma, and asthma level (p< 0.05); Serum level of IL-35 negatively correlated to the severity of asthma and asthma level (p< 0.05). Serum IL-16 level was positively correlated with the serum level of MCP -1 (p<005), and negatively correlated to the level of serum IL-35 (p< 0.05), serum MCP - 1 level negatively correlated with serum IL-35 level (p< 0.05). Conclusion IL-16, MCP-1 highly express in serum in children with asthma; IL-35 lowly expresses in serum in children with asthma; IL-16, IL-35, MCP-1 are closely related with the onset and development of asthma.
     【Key words】  Bronchial asthma, Illness, Interleukin 16, Interleukin 35, Monocyte chemotactic protein 1
     【Author′s address】 Third People′s Hospital of Huizhou City, Huizhou, Guangdong, 516000,PRC
  doi:10.3969/j.issn.1671-332X.2015.02.007

  支气管哮喘（简称哮喘）是儿呼吸科常见的呼吸系统疾病［1］，多种细胞因子和炎性因子在哮喘发病过程中起介导作用［2］。白细胞介素（Interleukin，IL）为研究较多的细胞因子，在炎症反应中起重要作用［3］；单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)为趋化因子亚家族成员之一［4］。研究显示，上述指标在呼吸系统疾病中均存在异常表达，但有关上述指标在哮喘中的表达及其与哮喘关系的国内研究较少［3-6］。因此本研究通过检测急性发作期哮喘儿童血清IL-16、IL-35、MCP-1水平，旨在探讨急性发作期哮喘患儿外周血中IL-16、IL-35、MCP-1的水平变化及意义。
1 资料与方法
1.1 一般资料
     选择2012年1月~2014年6月期间被我院收治的60例哮喘急性发作期患儿为研究对象，患儿年龄3~15岁，平均（5±3）岁;男32例，女28例;平均病程(4±2)年。另选择同期我院36例哮喘缓解期患儿为疾病对照组，患儿平均年龄（6±3）岁;男20例，女16例；平均病程（3±1）年。上述患儿均符合哮喘的诊断标准［1］。选择2012年1月~2014年6月期间在我院接受健康体检的健康儿童40例为健康对照组，儿童年龄（4~15）岁，平均（5±2）岁;男22例，女18例。三组在年龄、性别方面比较差异无统计学意义（p>005），急性发作期和缓解期患儿在病程方面亦不具有统计学差异（p>005）。健康儿童纳入标准［2］：年龄4~15岁，在我院体检中心健康体检的儿童；无哮喘病史及家族史；无过敏性鼻炎和其他过敏史；3个月内未使用肾上腺皮质激素和免疫抑制剂或其它免疫调节剂；无特殊疾病史，近期1个月内无感染史。哮喘组纳入标准［1］：年龄3~15岁，均为新发或停止规范吸入糖皮质激素三个月以上的复发哮喘，符合《儿童支气管哮喘诊断与防治指南》的诊断标准［1］。本研究均获受试者监护人知情并签署知情同意书。
1.2 方法
1.2.1 哮喘急性发作期治疗 进行规范化吸入治疗：给予沙美特罗替卡松干粉剂（50/100，葛兰素史克公司）1吸，2次/日，共12周；允许按需吸入沙丁胺醇气雾剂（葛兰素史克公司）作为症状缓解药物［3］。
1.2.2 标本采集 取受试者空腹静脉血3 ml（急性发作期患儿于治疗后1个月再次抽取3 ml静脉血进行相关指标检测），迅速3 000 r/min离心15分钟，上清液-80 ℃保存待测。
1.2.3 指标检测 采用双抗体夹心ELISA法检测血清IL-16、IL-35、MCP-1等指标，试剂盒购自于华大基因，严格按照说明书进行操作。 
1.3 观察指标 
     统计受试者血清IL-16、IL-35、MCP-1水平，并对血清IL-16、IL-35、MCP-1水平与年龄、病程、性别、哮喘严重程度、病情进行相关性分析。
1.4 统计学方法 
     采用SPSS 19.0，计量资料执行t检验或单因素方差分析，组间两两比较采用SNK（q）检验，采用Pearson检验进行相关性分析；p<005为差异有统计学意义。
     2 结果
2.1 治疗前三组患儿的血清IL-16、IL-35、MCP-1水平分析
  比较三组患儿血清IL-16、IL-35、MCP-1水平，组间比较采用SNK（q）检验，结果显示，三组患儿血清IL-16、IL-35、MCP-1水平存在显著性差异（p<001）；哮喘急性发作期血清IL-16、MCP-1水平均高于哮喘缓解期、健康对照组，差异有统计学意义（p<001）；缓解期患儿血清IL-16、MCP-1水平高于健康对照组，两组比较有统计学意义（p<001）；哮喘急性发作期血清IL-35水平均低于哮喘缓解期、健康对照组，差异有统计学意义（p<001）；缓解期患儿血清IL-35水平低于健康对照组，差异有统计学意义（p<001）,见表1。

表1 治疗前三组患儿血清IL-16、IL-35、MCP-1水平比较

（±s,pg/ml）

组别	n	IL-16	IL-35	MCP-1
急性发作期	60	312.27±21.261)2)	52.78±4.291)2)	45.72±5.171)1)2)
疾病对照组	36	67.56±10.411)	58.82±4.631)	37.19±4.211)
健康对照组	40	33.89±8.18	63.49±4.81	14.02±3.56
F值		39.9576	7.6782	8.7959
p值		0.0000	0.0005	0.0003

 注：与对照组比较，1)p<0.01；与疾病对照组比较，2)p<0.01
2.2 治疗前哮喘中重度组、轻度组患儿血清IL-16、IL-35、MCP-1水平
     将60例哮喘急性期患儿按照严重程度分为中重度组（22例）、轻度组（38例）；三组儿童血清IL-16、IL-35、MCP-1水平存在显著性差异（p<0.01）；哮喘中重度组血清IL-16、MCP-1水平均高于轻度组、对照组，差异有统计学意义（p<0.01）；轻度组患儿血清IL-16、MCP-1水平高于对照组，比较有统计学意义（p<0.01）；哮喘中重度组血清IL-35水平均低于轻度组、对照组，差异有统计学意义（p<001）；轻度组患儿血清IL-35水平低于对照组，比较有统计学意义（p<0.01），见表2。

表2 哮喘中重度组、轻度组患儿血清IL-16、IL-35、MCP-1水平比较

（±s,pg/ml）

组别	n	IL-16	IL-35	MCP-1
中重度组	22	339.75±23.521)2)	49.28±4.111)2)	50.81±5.281)2)
轻度组	38	297.62±20.491)	53.58±4.391)	42.27±5.161)
健康对照组	40	33.89±8.18	63.49±4.81	14.02±3.56
F值	21.6981	8.5891	10.0862
p值	0.0000	0.0001	0.0001

 注：与健康对照组比较，1)p<0.01；与轻度组比较，2)p<0.01
2.3 治疗前、治疗后哮喘急性发作期患儿血清IL-16、IL-35、MCP-1水平
     对哮喘急性发作期患儿治疗前、治疗后血清IL-16、IL-35、MCP-1水平进行比较，结果显示，治疗后哮喘急性发作期患儿血清IL-16、MCP-1水平低于治疗前，差异有统计学意义（p<0.001），治疗后哮喘急性发作期患儿血清IL-35水平高于治疗前，差异有统计学意义（p<0.001），见表3。

表3 治疗前、治疗后哮喘急性发作期患儿血清IL-16、

      IL-35、MCP-1水平比较

（n=60,±s,pg/ml）

组别	IL-16	IL-35	MCP-1
治疗前	312.27±21.26	52.78±4.29	45.72±5.17
治疗后	89.76±10.261)	59.62±4.361)	35.28±4.121)
t值	51.6812	11.7129	15.9816
p值	0.0000	0.0000	0.0000

 注：与治疗前比较，1)p<0.01
2.4 各指标与年龄、病程、性别、哮喘严重程度、病情的相关性分析
     对血清IL-16、IL-35、MCP-1等指标与年龄、病程、性别、哮喘严重程度、病情等因素进行相关性分析，结果显示，血清IL-16、MCP-1水平与哮喘严重程度、病情呈正相关（p<0.05）；血清IL-35水平与哮喘严重程度、病情呈负相关（p<0.05）；血清IL-16、IL-35、MCP-1等指标与年龄、病程、性别等因素无明显相关性（p>0.05）；血清IL-16水平与血清MCP-1水平呈正相关（p<0.05），与血清IL-35水平呈负相关（p<0.05），血清MCP-1水平与血清IL-35水平呈负相关（p<0.05），见表4。

表4 各指标与年龄、病程、性别、哮喘严重程度、病情的相关性

 

指标	IL-16	IL-35	MCP-1
	r	p	r	p	r	p
年龄	0.212	0.071	-0.019	0.897	0.158	0.312
病程	0.189	0.082	-0.032	0.836	0.192	0.079
性别	0.136	0.081	-0.196	0.075	0.197	0.078
严重程度	0.702	0.016	-0.651	0.022	0.598	0.037
病情	0.629	0.026	-0.718	0.012	0.701	0.017
IL-16	-	-	-0.582	0.032	0.615	0.019
IL-35	-0.582	0.032	-	-	-0.597	0.030
MCP-1	0.615	0.019	-0.597	0.030	-	-

3 讨论
     IL-16为IL家族成员之一，是一种重要的炎性因子和淋巴细胞趋化因子，可促进IL-6、TNF-α等细胞因子的分泌，具有多种功能，在介导炎症反应及免疫调节方面均可起作用［7-9］。国外文献［8］报道，哮喘患者血清IL-16水平明显高于健康人群。本研究检测哮喘患儿血清IL-16含量，实验结果显示，哮喘儿童血清IL-16检测含量明显高于健康儿童，且随着哮喘病情的加重及进展，血清IL-16水平呈现上升趋势。表明IL-16的表达与哮喘发病及病情进展密切相关，通过检测血清IL-16水平可以监测哮喘发病及病情进展。本研究中，随着哮喘病情的进展和加重，血清IL-16水平呈现上升趋势，说明IL-16在哮喘的发病中可能起正性调节作用，IL-16可诱导相关细胞因子和炎症介质表达，导致气道狭窄，进而引起哮喘的发病及进展［10］。
     MCP-1为趋化因子亚家族成员之一，可促进细胞转移，具有调节神经功能和免疫活性的作用，可参与机体免疫反应［4］。国外研究［4］发现，呼吸系统疾病患者血清MCP-1水平高于健康人群，且与疾病病情存在一定的联系。本研究显示，哮喘患儿血清MCP-1水平高于健康儿童，且随着哮喘病情的加重及进展，MCP-1水平亦明显上升。提示MCP-1与哮喘病情严重程度及进展密切相关。本研究中哮喘患儿血清MCP-1出现异常表达，可能与MCP-1介导机体免疫应答、增强哮喘易感性有关，MCP-1可通过调节机体免疫水平和炎症反应，诱导哮喘发病，这可能是哮喘患者外周血MCP-1表达增强的原因之一［4］。
     IL-35具有很强的生物学作用，在免疫、炎症性疾病病情的调控中扮演重要角色，在抑制炎症的发生和进展中具有重要作用，新近研究也显示，IL-35可能与呼吸系统疾病的发病及进展有关［11］。本研究检测哮喘患儿血清IL-35含量，实验结果显示，哮喘患者血清IL-35检测含量明显低于健康儿童，且随着哮喘病情的加重和进展，血清IL-35呈现下降趋势。本研究中哮喘患儿血中IL-35出现异常表达，笔者分析与下述因素有关：健康儿童体内无急性炎症反应，因此机体血清IL-35可正常表达，而哮喘缓解期患儿病情处于稳定期，炎症反应轻，因此IL-35在机体血清中检测水平高于哮喘急性期；哮喘急性期及中重度哮喘患儿体内存在氧化应激和炎症反应，机体免疫功能受损，因此IL-35可出现低表达［11］。这也表明IL-35与哮喘的发生、进展及病情严重程度密切相关，通过检测血清IL-35含量可预测哮喘病情及进展。
     本研究对血清IL-16、IL-35、MCP-1等指标与年龄、病程、性别、哮喘严重程度、病情等因素进行相关性分析，结果显示，血清IL-16、MCP-1水平与哮喘严重程度、病情呈正相关（p<005）；血清IL-35水平与哮喘严重程度、病情呈负相关（p<005）；血清IL-16水平与血清MCP-1水平呈正相关（p<005），与血清IL-35水平呈负相关（p<005），血清MCP-1水平与血清IL-35水平呈负相关（p<005；经规范化治疗后，IL-16、IL-35、MCP-1等指标水平均较治疗前改善。表明血清IL-16、IL-35、MCP-1与哮喘严重程度及哮喘病情间存在明显的相关性；IL-16、IL-35、MCP-1可作为一个新的治疗靶点用于哮喘急性发作的治疗，临床可通过调控IL-16、IL-35、MCP-1的表达来控制哮喘的临床症状及疾病严重程度［8］。
     本研究不足之处是入组对象较少、规模较小，因此，仍然需要更大规模的临床研究进一步验证。IL-16、MCP-1在哮喘患儿血中高表达，IL-35在哮喘患儿血中低表达；IL-16、IL-35、MCP-1与哮喘发病及进展密切相关。

参考文献
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